刘宏伟
,
赵鑫
,
程凯
,
赵宗宝
,
叶明亮
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00382
斯达氏油脂酵母能在细胞内合成大量的油脂,其细胞内的脂类物质影响着蛋白质提取和后续的蛋白质组学分析.常见的一步蛋白质提取法很难从含有大量油脂的斯达氏酵母细胞中提取蛋白质,因此其蛋白质组学分析的结果较差.本文发展了顺序提取法提取斯达氏酵母中的蛋白质,并采用在线多维微柱反相液相色谱-串联质谱联用技术分析其蛋白质组;共鉴定到227个高可信度的蛋白质,其数目是一步提取法的两倍;此外,所鉴定到的参与基础代谢的蛋白质数目比一步提取法也显著增加.此方法可以有效提取含大量油脂的物种中的蛋白质,为油脂积累的分子机制研究提供重要的信息.
关键词:
在线多维微柱反相液相色谱-串联质谱
,
样品前处理
,
顺序提取
,
蛋白质组分析
,
斯达氏油脂酵母
吴倩
,
王璐
,
吴大朋
,
段春凤
,
关亚风
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.01039
植物激素是植物中一类含量很低,却对植物生长发育等生命过程起重要调控作用的有机化合物。近年色谱/质谱联用技术不断发展,已成为植物激素分析的常用方法,而样品前处理则是色谱分析过程中的一个关键环节,所以高选择性和高回收率的前处理方法对于植物激素的分析至关重要。根据植物激素的化学性质,本文将其分为酸碱性植物激素、油菜素甾醇、植物多肽3类,并对相应的前处理方法加以综述,特别是近年来发展起来的新方法。内容包括前处理方法的原理、装置、萃取材料以及衍生试剂等,相关内容主要围绕本研究组的痕量植物激素研究工作展开,最后对研究趋势做了简短展望。
关键词:
样品前处理
,
植物激素
,
赤霉素
,
油菜素甾醇
,
植物多肽
郝亮
,
吴大朋
,
关亚风
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.07045
大气颗粒物中有机物成分分析对深入研究大气颗粒物对人类健康、环境、气候、生态的影响,解析气溶胶来源,制定颗粒物控制相关法规,以及风险管理方法具有重要意义.由于颗粒物中的有机组分种类繁多,分析复杂,目前仅10%~20%的有机物得到了定性和定量分析.因此,大气细颗粒中有机物的分析已成为环境分析领域的优先发展方向.色谱是大气颗粒物中有机物分析的主要方法,而样品制备则是影响分析速度和精度的关键步骤.本文对颗粒物中有机组分色谱分析前的样品制备方法进行了综述,介绍了索氏提取、超声辅助提取、微波辅助提取、加压溶剂提取等溶剂提取方法以及热解吸提取方法,并重点介绍了这些方法在大气颗粒物样品处理中的应用,总结了各种方法的优缺点.
关键词:
大气颗粒物
,
有机组分
,
样品制备
,
色谱分析
张晓娜
,
卢明华
,
徐林芳
,
校瑞
,
蔡宗苇
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.04029
赤霉素( gibberellins,GAs)作为植物体内广泛存在的一类激素,可刺激植物叶和芽的生长,对植物的生长起着至关重要的调控作用。截至目前,已发现的 GAs高达136种之多。所有已知的 GAs均为二萜酸,具有相似的化学结构,都含有赤霉素烷骨架,即4个环,仅环上双键、羟基数目和位置不同。但由于GAs缺乏特定光学特性(紫外和荧光)和化学特性,同时在植物体内含量极低(一般为 ng/g,甚至为 pg/g 水平),常规的分析方法和检测技术难以实现对该类物质的定性定量分析。近年来相关研究人员一直致力于各种高效、快速、灵敏的 GAs分析新方法和新技术的研究。本文就 GAs的检测方法和分析技术进行综述,为更好地开展赤霉素类植物激素的研究提供参考。
关键词:
赤霉素
,
植物激素
,
分析方法
,
样品前处理
,
综述
唐君
,
郭凯珠
,
陈文东
,
宋培培
,
封顺
,
胡巢凤
,
许瑞莲
,
田瑞军
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.09033
建立了基于Fe3O4/乙二胺四乙酸(EDTA)磁性粒子的集成化蛋白质组学研究方法.首先用共沉淀法合成EDTA负载的Fe3O4/EDTA磁性粒子.在优化的溶液条件下(95%乙腈-1%三氟乙酸,体积分数),100 μg Fe3O4/EDTA磁性粒子可吸附12.4μg牛血清白蛋白(BSA),吸附容量是商品化磁珠的10倍左右.以BSA作为标准蛋白质,对所合成的Fe3O4/EDTA磁性粒子作为蛋白质组学反应器的酶解时间进行了优化,发现Fe3O4/EDTA磁性粒子处理BSA酶解1、8和16h的肽段序列覆盖率和特征肽段结果相当.因此,可以将复杂的蛋白质样品前处理时间缩短至2h内.最后,将所合成的Fe3O4/EDTA磁性粒子应用于血清的蛋白质组学研究,成功地鉴定出218种蛋白质,其中包含了41种美国食品药品管理局(FDA)认证的生物标志物.所发展的基于Fe3O4/EDTA磁性粒子的蛋白质组学样品前处理方法将蛋白质样品预富集、还原、烷基化、酶解、多肽除盐和洗脱等步骤集成到一起,减少了样品转移和处理所造成的损失.这种技术具有快速、灵敏和易于操作的特点,可用于临床蛋白质组学研究.
关键词:
Fe3O4/乙二胺四乙酸(Fe3O4/EDTA)
,
磁性粒子
,
蛋白质组学
,
样品前处理